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液相色谱仪进行分析方法检测发展过程中对液相色谱仪系统设计温度的设定及控制技术要求都相当高对于色谱柱及检测器都要求能准确地控制管理工作生活环境以及温度一般企业而言色谱柱的恒温精度可以要求在±0.1~0.5℃之间检测器的恒温要求则更高。
在色谱仪分析系统中温度对溶剂的溶解能力、色谱柱的性能、流动相的粘度都有影响一般来说,温度升高,可提高溶质在流动相中的溶解度,从而降低其分配系数,但对分离选择性影响不大;还可使流动相的粘度降低,从而改善传质过程并降低柱压除此之外,温度太高易使流动相产生气泡,对检测结果造成干扰。
液相色谱柱的温度主要是由柱温箱来控制,不同工作温度对保留时间、相对保留时间都有影响柱温升高可加快分离过程,但因样品保留时间不稳将增加检测工作的麻烦,分辨率也可能下降;相反当柱温低,分辨率提高,但分离过程时间会加长,因为在温度低的情况下,流动相黏度增加会延长检测时间增加泵的磨损,同时溶解度相对下降会出现缓冲盐结晶而堵塞泵、进样阀、管道、色谱柱的现象,杂质吸附在填料上而难于洗脱,从而影响色谱柱的使用寿命不同的检测器对温度的敏感度不一样紫外检测器一般在温度波动超过±0.5℃时,就会造成基线漂移起伏示差折光检测器的灵敏度和小检出量常取决于温度控制精度,因此需控制在±0.001℃左右微吸附热检测器也要求在±0.001℃以内。
总的说来液相色谱仪分析检测中,柱温对分离的影响并不显著,通常实验在室温下进行操作在液固色谱中有时将极性物质(如缓冲剂)加入流动相中以调节其分配系数,这时温度对保留值的影响很大。